《丹参酮ⅡA通过调节线粒体转位蛋白诱导HepG2细胞凋亡》

技术简介：

目的探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TanⅡA)通过调节线粒体转位蛋白(translocatorprotein, TSPO)诱导HepG2细胞凋亡中的作用及可能存在的作用机制。方法采用MTT比色法检测TanⅡA对HepG2细胞增殖的影响，AnnexinV-PE/7-氨基-放线菌素D双染色法和Hochest染色法观察细胞凋亡率，荧光素酶发光法检测HepG2细胞中ATP的含量，Clark氧电极法测定细胞耗氧率，JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位变化，免疫荧光染色法观察转位蛋白在细胞内的表达及定位，免疫印迹法检测线粒体内细胞色素C、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9的表达。结果TanⅡA能够剂量依赖性地抑制肝癌细胞HepG2增殖，诱导细胞凋亡、ATP生成减少、耗氧量降低以及线粒体膜电位的下降。同时，TanⅡA可诱导HepG2细胞TSPO表达上调并聚集于核内。结论TanⅡA可诱导HepG2细胞凋亡，其机制与促进细胞转位蛋白TSPO表达及细胞核转位，进而引起线粒体功能障碍有关。

研发人员：张谊;欧玉龙;王惠霞;黄晓佳