《Let-7a-5p靶向整合素αV调节气道平滑肌细胞转化生长因子β1表达和活化》

技术简介：

为探究微小RNA(microRNA,miRNA)let-7a-5p对气道平滑肌细胞(airwaysmooth muscle cells, ASMCs)转化生长因子β1(transformationgrowth factorβ1,TGFβ1)表达和活化的影响，本研究使用生物信息学方法预测let-7a-5p靶基因，构建含靶基因3′-UTR段的双荧光素酶报告载体，验证其活性；随后采用let-7a-5p模拟物和抑制剂分别增加和降低ASMCs胞内let-7a-5p表达，检测TGFβ1的表达以及分泌。预测显示，let-7a-5p靶向整合素αV(integrinαV,ITGAV)基因3′-UTR。构建含ITGAV基因3′-UTR序列双荧光素酶报告质粒、凝胶电泳和基因测序。结果表明，质粒重组成功。Let-7a-5p模拟物显著降低荧光素酶活性和ITGAV基因mRNA表达，提示let-7a-5p靶向ITGAV基因3′-UTR。Let-7a-5p模拟物显著降低ASMCs胞内TGFβ1的mRNA表达，但增加胞外TGFβ1含量。Let-7a-5p通过靶向ITGAV基因降低ASMCs胞内TGFβ1表达，但促进胞外TGFβ1活化，提示let-7a-5p可能通过靶向ITGAV促进TGFβ1活化参与气道结构和功能的调控。

研发人员：闻康;郭佳;倪凯;杨崇鑫;罗明志;邓林红;